電泳分析常用方法

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電泳分析常用方法

（一）醋酸纖維素薄膜電泳

醋酸纖維素是提纖維素的羥基乙?；纬傻睦w維素醋酸酯。由該物質(zhì)制成的薄膜稱(chēng)為醋酸纖維素薄膜。這種薄膜對蛋白質(zhì)樣品吸附性小，幾乎能完全消除紙電泳中出現的“拖尾”現象，又因為膜的親水性比較小，它所容納的緩沖液也少，電泳時(shí)電流的大部分由樣品傳導，所以分離速度快，電泳時(shí)間短，樣品用量少，5μg 的蛋白質(zhì)可得到滿(mǎn)意的分離效果。因此特別適合于病理情況下微量異常蛋白的檢測。

醋酸纖維素膜經(jīng)過(guò)冰醋酸乙醇溶液或其它透明液處理后可使膜透明化有利于對電泳圖譜的光吸收掃描測定和膜的長(cháng)期保存。

⒈材料與試劑 醋酸纖維素膜一般使用市售商品，常用的電泳緩沖液為pH8.6 的***緩沖液，濃度在0.05-0.09mol/L。

⒉操作要點(diǎn)

⑴膜的預處理：必須于電泳前將膜片浸泡于緩沖液，浸透后，取出膜片并用濾紙吸去多余的緩沖液，不可吸得過(guò)干。

⑵加樣：樣品用量依樣品濃度、本身性質(zhì)、染色方法及檢測方法等因素決定。對血清蛋白質(zhì)的常規電泳分析，每 cm加樣線(xiàn)不超過(guò)1μl，相當于60-80μg的蛋白質(zhì)。

⑶電泳：可在室溫下進(jìn)行。電壓為25V/cm，電流為0

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