如何判斷色譜柱什么時(shí)候該換新柱了？
相信每個(gè)色譜工作者都會(huì )關(guān)心分辨率，分辨率是考察根色譜柱分離具體樣品的好壞程度的指標。色譜的**任務(wù)就是為了使每個(gè)峰完成分離，我們在實(shí)際工作中需要得到合理峰寬的窄峰以便獲得較低的檢測限(這已經(jīng)不是什么難題，現在的色譜柱都可以達到這個(gè)要求)。
較好的方法是使用壓力、分辨率和峰形的混合指標來(lái)考察根色譜柱的狀態(tài)。壓力的測量是容易的，通常我們確定的色譜方法要滿(mǎn)足以下的要求：用新柱子時(shí)柱壓不于2500psi，在任何情況下壓力都不超過(guò)3000psi。盡管現代的液相色譜系統都可在更的壓力下使用，但由于壓產(chǎn)生的系統損耗和泄漏的問(wèn)題會(huì )很?chē)乐?。當壓力超過(guò)3000psi時(shí)，考慮更換進(jìn)樣器和色譜柱之間的0.5mm孔徑的在線(xiàn)濾片。如果更換濾片后壓力仍然，則色譜柱的濾片或者是色譜柱已經(jīng)被污染，這提示我們該換柱子了。有統計表明，超過(guò)60%的色譜柱損壞是由于壓力過(guò)的原因。
分辨率是我們考察色譜柱的個(gè)非常重要的指標，只要兩個(gè)組分可以獲得基線(xiàn)分離，對該分析物的定量就不會(huì )有什么問(wèn)題。對于對稱(chēng)的斯峰來(lái)講，1.5的分辨率即可得到基線(xiàn)分離;若Rs在1.7至2.0之間則更好。若峰拖尾嚴重則需要更的分辨率。使用分辨率作為色譜柱的評價(jià)指標的好處在于我們可以直觀(guān)地看到相鄰的峰的分離情況。
另外個(gè)考察色譜柱質(zhì)量的標準是峰形拖尾情況，廠(chǎng)測試報告的峰形都非常漂亮，但這并不代表該色譜柱分析實(shí)際樣品的情況。實(shí)際樣品中總是含有或多或少引起峰形拖尾的組分。值得提的是含有氮原子的化合物，這些化合物和硅膠骨架上的游離硅羥基結合非常緊密，隨著(zhù)色譜柱使用時(shí)間越長(cháng)，鍵合相流失，拖尾則更加嚴重。然而拖尾情況的改變不像分辨率的改變那樣能夠馬上看出來(lái)?；诖?，好定個(gè)拖尾因子的上限，如美藥典規定拖尾因子不超過(guò)1.8。
確定色譜柱“拋棄”標準的時(shí)間是當我們開(kāi)發(fā)分析方法或作方法認證的時(shí)候。通常，在開(kāi)發(fā)分析方法的過(guò)程中你會(huì )試驗幾根色譜柱，分析足夠多的實(shí)際樣品，你知道當分離變差的時(shí)候是什么樣的情況。我傾向于在開(kāi)始時(shí)使用個(gè)寬的范圍。我們的經(jīng)驗是這樣的：你如果在開(kāi)始時(shí)緊縮系統適用性要求，在方法認證后再放寬這個(gè)要**很困難的。在分析實(shí)際樣品之前進(jìn)行系統適用性考察，以確保該色譜方法滿(mǎn)足分析者可以接受的標準。
上海嘉鵬科技有限公司專(zhuān)業(yè)生產(chǎn)：紫外分析儀、三用紫外分析儀、暗箱式紫外分析儀、暗箱三用紫外分析儀、暗箱紫外分析儀、手提式紫外分析儀、三用紫外分析儀暗箱式、紫外檢測儀、部分收集器、恒流泵、蠕動(dòng)泵、凝膠成像系統、凝膠成像分析系統、化學(xué)發(fā)光成像分析系統、光化學(xué)反應儀、旋渦混合器、漩渦混合器、玻璃層析柱、梯度混合器、梯度混合儀、核酸蛋白檢測儀、玻璃層析柱、熒光增白劑測定儀、餾分收集器、切膠儀、藍光切膠儀、層析系統等產(chǎn)品。歡迎來(lái)電咨詢(xún)。
上海嘉鵬科技有限公司 www.wzaoli.com
電話(huà)：021-66030766 36162366
400免費咨詢(xún)電話(huà)：4000-123-925
手機：13585698333 18918199710 13501668369
企業(yè)QQ，2880150292，2880150293，2880150290，2880150297