微流控芯片上基于核酸適配體的蛋白質(zhì)檢測方法研究

2016（第四屆）先進(jìn)體外診斷技術(shù)峰會(huì )于3月25日在上海順利召開(kāi)。此次會(huì )議邀請了內外眾多體外診斷方面的專(zhuān)學(xué)者，以及在體外診斷域取得不俗業(yè)績(jì)的企業(yè)代表。

會(huì )議的第天來(lái)自清華大學(xué)化學(xué)系的林金明教授做了精彩的演講。演講主要圍繞著(zhù)微流控芯片上給予核酸適配體的蛋白質(zhì)檢測方法研究。

演講中林教授提到。微流控芯片技術(shù)可以繼承或基本繼承化學(xué)和生物等域中所涉及的樣品制備、反應、分離、檢測等基本操作單元，以微通道形成網(wǎng)絡(luò )，貫穿整個(gè)系統，具有便攜、低能耗、易于制作、易于掌握等點(diǎn)，易于滿(mǎn)足生命科學(xué)對生物樣品進(jìn)行低劑量、更效、靈敏、快速分離分析的需求。利用微流控芯片夠賤種簡(jiǎn)單便攜的裝置用于生物標記物的檢測，有望未來(lái)戶(hù)外即時(shí)診斷和庭醫療新的方法。生物標記物特別是蛋白質(zhì)標志物進(jìn)行快速靈敏的檢測是臨床醫療診斷、****的個(gè)重要依據。由于微流控芯片的微型化，所需的樣品量少（<10μL）。所以靈敏度是微流控芯片上蛋白質(zhì)分析的個(gè)重要難點(diǎn)。

**分析的滾環(huán)放大技術(shù)（immuno-RCA）是種基于**分析、靈敏的核算放大技術(shù)。RCA可以在室溫、恒溫下進(jìn)行DNA擴增，不需要特殊的起。通過(guò)**反應，目標蛋白與功能性核酸配體相結合獲得段具有催化作用的G-四鏈體。然后，通過(guò)RCA獲得條重復序列的G-四鏈體。G四鏈體能與血紅素自組裝，在A(yíng)BTS和過(guò)氧化氫作用下，產(chǎn)生不同的顏色，可用肉眼直接觀(guān)察。更為重要的是，根據現行動(dòng)力學(xué)模型進(jìn)行的RCA反應能夠直接進(jìn)行半定量分析不需要過(guò)多的標準物。因此，RCA是種適合在芯片上進(jìn)行信號擴增的新技術(shù)，能及大地提分析的敏感性和特異性，用于微量的生物大分子和生物標志的檢測與研究，是未來(lái)生物芯片發(fā)展和普及使用不可缺少的檢測手段。

林教授的研究以檢測凝血酶為例，將微流控芯片技術(shù)和功能性核酸適配體的**分析技術(shù)相結合，發(fā)展了種快速簡(jiǎn)單、靈敏度、易于攜帶的裝置用于生物標志物的分析。此方法在微流控芯片上平行的排列了多個(gè)微通道，并在通道上修飾具有特異性的核酸適配體目標蛋白質(zhì)進(jìn)行的通量、特異性捕獲和分析，降低了基質(zhì)干擾。利用滾環(huán)擴增和G-四鏈體DNAzyme的作用，實(shí)現了信號的放大，提分析的靈敏度，降低檢測限。同時(shí)，可以通過(guò)顏色的變化，可以通孤傲肉眼進(jìn)行初步的判斷。

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